Снижение скорости элюции.

[Archvile]

Доброго времени суток, уважаемые участники форума. С недавних пор вынужден самостоятельно знакомиться с увлекательным миром ВЭЖХ и столкнулся с трудностью, которую не в состоянии разрешить. Очищаю радиоактивномеченые стероиды на колонке Elsico 150x4 6 мкм. Технология предусматривает подготовку колонки промывкой 15 минут диоксаном, 15 минут метанолом при скорости элюции 1 мл/мин. Затем, после внесения пробы используется элюент - смесь метанола и 0,05 М ацетата натрия. На этом этапе и проявляется проблема, при выставленной на насосе скорости элюции в 1 мл/мин, с колонки выходит 400-500 мкл/мин. После замены элюента на метанол нормальная скорость постепенно восстанавливается. Буду очень благодарен за любые советы и рекомендации.

[Иван Стыскин]

Думаю дело в работе входного клапана, на чистом метаноле давление низкое - работает нормально. Если без колонки расход стабильный на рабочей подвижной фазе - попробуйте снять входной клапан и в УЗ ванне промыть, скорее всего соли "сели", если не поможет поменять.
Какой фирмы и модели насос?

[Archvile]

Насос старенький. Pharmacia LKB.

[Иван Стыскин]

Ну какой бы он ни был)) LKB 2150 или 2248 - на них все еще выпускаются запчасти.