перегруз колонки

[елена]

ДД, работаю на С8 150 мм Х 6,0 мм, определяю примеси в фарм. субстанции. Нормы содержания примеси очень малы и чтобы соблюсти зависимость между концентрацией испытуемого раствора , стандартного раствора примеси и нормой примеси приходится брать большую навеску субстанции. Тогда основной пик на хроматограмме испытуемого раствора просто огромных размеров, без вершины, попросту обрезан..уменьшила объем вкола до минимума, но не помогает..насколько плохо для колонки работать в режиме??

[Константин Сычев]

ДД, Елена! )) Основное и примеси определяют вколом разных растворов, разной, соответственно, концентрации - это стандартная практика. Конечно, при определении примесей пики основных в зашкале - а как может быть иначе?
Не, колонке совершенно наплевать сколько там этого вещества - если оно выходит другое дело - что разделение страдает. Если да, то берите колонку побольше, например, 250мм, или даже две по 250мм. Если давления не боитесь, то все будет не так уж и медленно Например, вот тут внизу на картинке - специально 500мм колонка поставлена под разделение самых мелких примесей в режиме жуткого перегруза - а эффективность при этом по мелким пичкам - почти 40 тысяч тарелок viewtopic.php?f=48&t=899

[елена]

Подскажите, пжлста, как можно реанимировать колонку С8? пробовали смесь метанол:вода (70:30) и чистый метанол.

[Константин Сычев]

Елена, а что значит реанимировать? что в ней не так? ... просто по опыту знаю, что большая часть таких вопросов никак не связана с загрязнением колонки... да, и что за колонка, и как она дошла до жизни такой?
а это не вы написали "подскажите, чем можно отмыть колонку С8 после фосфатного буфера и парацетамола" на анчеме? от соли - теплой водой но сам вопрос очень настораживает, колонка не перестает работать ни от соли, ни от (тем более!) парацетамола. Скорее, вы не говорите реальную проблему)

[Иван Стыскин]

Судя по размеру 6х150 это японская колонка ymc)) Нагружать ее можно прилично, да и ушатать сложно...
Хотелось бы конечно глянуть хроматограмму.
http://www.ymc.co.jp/en/columns/ymc_pac ... index.html

[елена]

ДД, ага, и там тоже я спрашивала..ну ооочень нужна сейчас эта колонка, а она кракозябры разные рисует вместо хроматограмм.. прикрепляю рисунки хроматограмм

[Константин Сычев]

Елена! ну какая отмывка... ну не глумитесь над трупом-то!) человек давно умер, и не надо так над ним издеваться) просто надо купить новую... если дотерпите до 11 ноября, то мы за так еще все Ваши вещества отколем - приходите на курсы 11-ого, только ближе к вечеру, часам к пяти.
А красивые пики выглядят вот так viewtopic.php?f=17&t=972

Кстати! обычно же у всех проблемы с аминофенолом, который выходит рядом с парацетамолом и плохо делится. Но у Вас эта примесь сильно дальше. Что там за примеси надо разделить? Каков полный список?

[елена]

а ведь воспроизводила фармакопейную методику согласно ГФ12, статья "парацетамол".. почему же я ее "убила"?

[Константин Сычев]

Так так.. с этого момента поподробнее! уж не та ли "суперметодика" с тетрабутиламмонием???
А она была новая? выглядит так, как будто она мертвая уж давным-давно.. как будто ей много уже лет в обед...

[елена]

совершенно верно, именно та самая методика с тетрабутиламмонием. колонка была слегка б/у)), на ней тоже должны были проводит анализ парацетамола, а как было в реале не знаю. потом колонка попала ко мне. в паспорте прочли, что если использовали тетрабутламмоний, то отмывать ее нужно иначе, пробовали, но без резулльтата.

[Константин Сычев]

Елена, колонка к Вам уже попала не слегка бу, а без минуты мертвой. Что с сумме с отвратительной "методикой" убило последнее дыхание жизни.
Методика нужна какая, чтобы одновременно определять и парацетамол, и аминофенол? Или только аминофенол? или еще какие-то примеси? Парацетамол в аптеке, а аминофенол у меня есть. Методика там простейшая и секундная.

[Константин Сычев]

Кстати, расщепление пиков за неделю уже должно поубавиться - можете проверить. Закончилось модифицирование колонки потому что. Но все равно - такое разделение - это не дело. С точностью интегрирования тут большие проблемы.

[елена]

а чем можно заменить тетрабутиламмония гидроксид??

[Константин Сычев]

Да в том-то и дело, что просто нужно взять другую, более подходящую колонку, и вообще никаких добавок не нужно, и никаких мучений. Подъезжайте в офис со стандартами, если повезет, то за день между делом и найдем лучший вариант. Ну или можно оставить стандарты и уехать. Я буду в офисе со вторника 16-00, среду, чт. и пятницу до 14-00, общий телефон офиса 495-210-1888
Просто там не С8 колонка нужна - вот в чем проблема этих "разработчиков"

[елена]

я, к сожалению,за 6000 км от Вас нахожусь. нет возможности приехать. а из колонок у меня есть интерсил ODS-3V, и колонки с набивкой С8 и С18, подскажите на какой можно попробовать?.

[Константин Сычев]

не знаю, Елена, к сожалению. там на С18, кажется, парацетамол плоховато делится от аминофенола. я бы взял самую длинную колонку соли не жалеть, до 50мМ, и поварьировать рН от 7 до 2. может, и повезет...