нулевая линия

[Ирина Вернер]

Уважаемые форумчане, помогите, пожалуйста, понять, что происходит - прибор Beckman Coulter при присоединенной колонке пишет нулевую линию в виде плавных горбов - горб за три-четыре минуты. Если колонку отсоединить, нулевая линия дрейфует вниз с наклоном градусов в 20-30.
Заранее спасибо.

[Константин Сычев]

Горбы - это колонка моется помаленьку. дрейф без колонки? а что за детектор?

[Иван Стыскин]

А картинку можно прикрепить? Думаю спектрофотометрический детектор.

[Ирина Вернер]

Во-первых, спасибо, что откликнулись!
Сегодня без колонки дрейфа нулевой линии нет. И без колонки нулевая - практически идеальна. Как подключаем колонку, начинается...
Картинки прикрепляю. Вторая - увеличенный кусок первой

[Ирина Вернер]

Детектор - Beckman Coulter System Gold 168 Detector - УФ, смотрим по 206 и 230 нм. Но аналогичные горбы и при 280 и 260

[Константин Сычев]

Здесь Иван получше ответит, поскольку, очевидно, проблема-то с жидкостной системой. Как самое простое - с клапанами. Просто я не спец по раритетной технике, а он знает)

Пока задам еще пару вопросов:
1. Подвижная фаза из чего состоит?
2. Дегазируете её? Если да, то как?
3. Какая скорость потока?
4. Какое давление?
5. Давление прыгает? Если да, то с какой амплитудой?
6. Прибор долго сухим стоял? на солевых буферах до этого работали?
7. В линии забора подвижной фазы пузыри есть? из-под клапанов течёт?
8. Установите 1 мл в минуту. Цилиндриком собирайте элюат. Ждите 10 минут. Сначала делаете опыт без колонки, а потом с колонкой. В обоих случаях набралось по 10 мл. Или меньше?

Приходите на курс по работе с прибором)) viewtopic.php?f=23&t=911

[Иван Стыскин]

Убедитесь что нет пузырей в магистралях. Начните с промывки водой всей системы без колонки, но с противодавлением. Возьмите какой нибудь капилляр 0.17 мм метров 5-10, он приличное давление создаст... Потом изопропанолом, но на меньшем потоке. Не поможет, скорее всего дело во входном клапане. Если насос System Gold 126/128 (2 компонентный градиент), то перейдите на второй канал насоса. Входной клапан с первого канала в УЗ ванну - на промывку.

[Ирина Вернер]

Отвечаю -
Во-первых, спасибо за приглашение на обучение)) Я бы с радостью - осталось руководство уговорить!
1. Подвижная фаза из чего состоит? - водный пропанол (10-30%) или PBS
2. Дегазируете её? Если да, то как? дегазировали ультразвуком, теперь перешли на использование вакуумного насоса
3. Какая скорость потока? 1 мл/мин
4. Какое давление? не более 0,3 KPSI
5. Давление прыгает? Если да, то с какой амплитудой? практически постоянно
6. Прибор долго сухим стоял? на солевых буферах до этого работали? работаем каждый день, можем в один день и в PBS, и в водном пропаноле
7. В линии забора подвижной фазы пузыри есть? из-под клапанов течёт? нет
8. Установите 1 мл в минуту. Цилиндриком собирайте элюат. Ждите 10 минут. Сначала делаете опыт без колонки, а потом с колонкой. В обоих случаях набралось по 10 мл. Или меньше? Насос А качает вполовину меньше, насос В - нормально

[Ирина Вернер]

Спасибо за советы, попробуем!

Убедитесь что нет пузырей в магистралях. Начните с промывки водой всей системы без колонки, но с противодавлением. Возьмите какой нибудь капилляр 0.17 мм, он приличное давление создаст... Потом изопропанолом, но на меньшем потоке. Не поможет, скорее всего дело во входном клапане. Если насос System Gold 128 (2 компонентный градиент), то перейдите на второй канал насоса. Входной клапан с первого канала в УЗ ванну - на промывку.

[Константин Сычев]

Ирина, у Вас с насосом беда. Ну с тем, что вполовину меньше качает - точно. Входные клапаны - сразу под подозрением. Отвечу завтра побольше.

[Ирина Вернер]

Ирина, у Вас с насосом беда. Ну с тем, что вполовину меньше качает - точно. Входные клапаны - сразу под подозрением. Отвечу завтра побольше.

Очень ждем Вашего ответа.

[Константин Сычев]

Ирина, нууу тут сложно сказать точно удалённо. Насос точно не работает, вопрос насколько это критично. Давлени 300 пси - это очень очень мало, на порядок меньше чем должно быть. Тест на сокрость потока Вы с нагрузкой делали или без? Такое впечатление что без... потому что 300 пси на колонке если это не древний 10-микронник - это очень мало. Ну и система очень странная... Из простого что можно сделать - входные клапаны прямо в сборе в кипяченую дист виду на час, можно с ультразвуком. Если никогда наосос не крутили сами то лучше не надо.. Иван ответит сколько стоит диагностика и ремонт..

Но всё как-то странновато работает.. хорошо бы Вам любой курс у нас посмотреть.. мы б и разделение подправили.. странное оно очень..