Обучающий курс "Общий курс ВЭЖХ. Разработка ВЭЖХ разделения:
- как удерживание зависит от структуры соединения,
- как изменять селективность и удерживание в различных режимах,
- от чего зависит воспроизводимость хроматографических данных,
- оптимизация разделения: выбор типоразмера колонки и скорости подвижной фазы,
- разметка, идентификация, количественный анализ,
- способы подавления уширения пиков, борьба с системными пиками,
- обзор типов коммерческих неподвижных фаз."
1-ый день
1. Хроматографические параметры и взаимосвязь между ними. Факторы, влияющие на разрешение пиков
2. Алгоритм разработки хроматографического разделения.
3. Адсорбционные (RP, NP, HILIC, IC, CT, LEC) и эксклюзионные (SEC, IEX) хроматографические режимы.
4. Смешанные режимы.
5. Связь между химической структурой целевого вещества и способностью удерживаться в том или ином режиме.
6. Прогнозирование порядка элюирования органических соединений в базовых и смешанных режимах.
7. Модель удерживания в обращенно-фазовом режиме. Регулирование удерживания и селективности. Преимущества и недостатки обращенно-фазовой хроматографии.
8. Модели удерживания в нормально-фазовом и гидрофильном режиме, их сходства и различия. Регулирование удерживания и селективности в нормально-фазовом режиме. Регулирование удерживания и селективности в гидрофильном режиме.
9. Модель удерживания в ионном режиме. Регулирование удерживания и селективности.
10. Динамическое модифицирование обращенных неподвижных фаз. Ион-парные обращенно-фазовые системы. Их преимущества и недостатки. Техника работы с ион-парными обращенно-фазовыми системами.
2-ой день
11. История развития технологии производства неподвижных фаз для жидкостной хроматографии.
12. Обзор коммерчески доступных обращенных неподвижных фаз.
13. Тестирование ОФ колонок. Что значит "аналогичная колонка". Выбор колонки, аналогичной данной.
14. Задача по оптимизации хроматографического разделения. Критерии оптимизации
15. Теория скоростей, уравнение Нокса. Гидродинамика ВЭЖХ колонки, уравнение Дарси.
16. Принцип выбора оптимальной скорости потока.
17. Принцип выбора длины колонки и размера частиц.
18. Ограничения, усложнящие маштабирование "традиционных" разделений до "быстрых".
19. Факторы, влияющие на уширение хроматографических пиков.
20. ВЭЖХ системы с переключением колонок. Системы эмуляции градентного элюирования. Системы с он-лайн твердофазной экстракцией.
21. "Ортогональность" хроматографических режимов. Двумерная ВЭЖХ. Система "хроматографической лупы" (heart-cutting HPLC).
3-ий день
16. Основы качественного анализа. Идентификация соединений.
17. Основы количественного анализа.
18. Основы валидации. Валидационные характеристики.
19. Валидация специфичности и робастности.
20. Критерии пригодности хроматографической системы.
21. Оформление методики согласно международным рекомендациям.
22. Тестирование ВЭЖХ колонок (практикум).