Про сорбенты

[Сергей Шабельников]

Здравствуйте,
Я - биолог, меня интересует анализ белков и пептидов, использую в работе Милихром А02. У меня возникла необходимость приобретения новых колонок, в связи с чем у возникли следующие вопросы к Элсико:
1. Объясните пожалуйста чем отличается сорбент Белсил 400 С4Т от Белсфер 500 RP-P, с точки зрения анализа белков. Зерно Белсфера покрыто полистиролом? Если нет то какая фаза привита? Какая химическая устойчивость? (Полистирольное зерно устойчиво в более широком диапазоне рН в отличие от SiO2)
2. Насколько я понял, зерно сорбента Диабонд С16Т имеет внешнюю оболочку проницаемую для пептидов и непроницаемую для белков, что позволяет анализировать белково-пептидные смеси без предварительного удаления белкового компонента. Какой размер имеют поры этой оболочки, в массе проходящих через неё пептидов или в нанометрах? Мне важно знать какие молекулы сядут на колонку, а от каких я смогу "избавиться".
3. Можно ли приобрести перечисленные сорбенты в формате 2х80 с зерном 5 мкм? Если только с зерном 10 мкм, то какова эффективность 2х80? Стоимость колонок с вышеперечисленными сорбентами?
4. Дайте пожалуйста более подробную информацию по картриджам Диапак (сорбенты, размеры, цены, брошюра по применению).

Буду благодарен за ответ

[Иван Стыскин]

Колонки мы больше не упаковываем, кроме того под А02 мы их и раньше мало упаковывали в силу специфичности прибора (слабого насоса и странного термостата). Возможно продать только сорбент. Из современных колонок от производителей можно предложить:
Reprosil C4 http://www.shop.hplc.ru/index.php?productID=3905
Vydac C4 http://www.shop.hplc.ru/index.php?productID=3386
Symmetry C4 http://www.shop.hplc.ru/index.php?productID=3528
Их можно заказать по международному стандарту в размере 2х100, 4х100 мм. Зернение 5 мкм.
Под максимальное давление Милихрома скорее всего это не подойдет...
Про 10 мкм можем уточнить у производителей.

[Сергей Шабельников]

Простите пожалуйста, Ваш сайт работает или нет?

http://www.hplc.ru/p01.htm
...Колонки ВЭЖХ для Милихромов разных моделей производятся ЭЛСИКО диаметром 1 мм длиной 150 и 250 мм, 2 мм - 40, 80 и 120 мм, 3 мм - 50, 150 и 250 мм...

...Колонки диаметром 2 мм выпускаются с широким ассортиментом сорбентов для всех видов ВЭЖХ. В них Вы можете иметь почти любую нужную для Вашей задачи химию сорбента, тогда как другие производители колонок имеют в ассортименте обычно только силикагель и С18 одного вида...

Иван, будьте так добры, если Вас не затруднит ответьте пожалуйста на вопросы про сорбенты из предыдущего сообщения, или этих сорбентов уже не существует?
Согласно технич. хар-кам Милихром А02 работает до 70 атм., вот только насосы по 2.5 мл - боюсь колонку 4.5 мм мне не прокачать достаточно пологим градиентом. Можете предложить потоньше? Согласен на длину от 80 до 150 мм. Может есть 1 мм колонки?

Спасибо,
Сергей

[Сергей Шабельников]

Да чёрт с ним, с термостатом, я его рассверлю...

[Сергей Шабельников]

Здравствуйте Иван,
Прошу меня извинить, но у меня очень много вопросов.
Среди перечисленных вами колонок меня заинтересовала Symmetry C4. Сколько будет стоить 2х100? Ещё вы обмолвились что можно приобрести сорбент, а можно ли приобрести к нему и пустые колонки 2х80 - 2х100? Имеет ли смысл попробовать набить колонку самостоятельно? Сможете дать рекомендации по набивке? Меня заинтересовал сорбент Диабонд С16Т, я спрашивал про него в первом сообщении, существуют ли колонки с аналогичным сорбентом от зарубежных производителей?

[Иван Стыскин]

Да мы действительно выпускали колонки, но увы этого человека нет, с ним ушла и технология. По сорбентам опять же не буду врать больше чем написано в http://www.hplc.ru/p04.htm информации не осталось, наличие посмотрели - увы колонок таких нет, хотя по складу значатся в размере 4х50 мм. По поводу самому набить лучше попробовать найти людей которые этим еще занимаются, тут нужен серьезный опыт и одного желания мало. По современным сорбентам есть данные на сайтах производителей.

Данные по колонке Symmetry C4 например http://www.waters.com/waters/partDetail ... =186000285
Возможные варианты готовых колонок http://www.waters.com/waters/keywordSea ... try%2520C4

По колонкам Reprosil 300 C4 http://reprosil.com/xedin.php?point=reprosil_pur.html
Тут преимущество в том, что производитель более "гибок" и может набить колонку под Вас в размере 1х100 или 2х100 мм.

С16 фазу никто не делает больше, насколько мне известно, под нее берут С18 с похожим содержанием углерода.

[Константин Сычев]

Замечу также, что на Милихром можно установить колонки 50х4 с 3мкм сорбентом - я работал даже без термостата, давление позволяло. Правда, тут есть много "но". Во-первых, нужен переходник под иглу Милихрома. Наверное, у Элсико такие есть. Второе, диаметр колонки сильно не уменьшишь - до 3 мм в крайнем случае, а 2 мм не пойдет - из-за уширения пиков из-за большого нулевого объема переходника. Можно рискнуть поставить с диаметром 2мм, если крутой градиент. В-третьих, если ставить 4 мм колонку (50х4), то максимальная емкость насосов относительно падает в (4/2)^2/8*5 = 2.5 раза относительно колонки 80х2, то есть анализ на полную емкость штоков будет в 2.5 раз короче.

Повторяю, можно рискнуть поставить фирменную колонку 50х2 с 3 мкм, если работа ведется в градиенте, через переходник. Но это такая terra incognita, и хороший результат тут никто гарантировать не может.