Оглавление

[Константин Сычев]

Практический курс жидкостной хроматографии
К. Сычев

Часть 1. ВЭЖХ для начинающих

Глава 1.1. Что такое жидкостная хроматография (ЖХ)

1.1.1. Физико-химический анализ. Адсорбция. Твердофазная экстракция и хроматография. Проведение хроматографического определения
1.1.2. Жидкостная хроматография низкого и высокого давления. Схема жидкостного хроматографа высокого давления
1.1.3. Способы улучшения разделения
1.1.3.1. Удерживание. Разрешение
1.1.3.2. Селективность как параметр, отражающий физико-химические взаимодействия в хроматографической системе
1.1.3.3. Эффективность хроматографической колонки. Пиковая плотность. Асимметрия пика
1.1.3.4. Связь разрешения с селективностью, эффективностью и фактором удерживания

Глава 1.2. Управление временем удерживания

1.2.1. Полярность. Полярные и неполярные растворители и адсорбенты
1.2.2. Как происходит удерживание. Что значит «нормальная фаза» и «обращенная фаза»? Элюирующая сила растворителя. Применение для элюирования смесей растворителей различной полярности. Компоненты элюента
1.2.3. Зависимость удерживания от состава элюента. Уравнение Скотта
1.2.4. Обращенно-фазовая хроматография. Примеры ОФ систем. Ион-парный ОФ режим
1.2.5. Изократическое и градиентное элюирование. Техника градиентного элюирования. Общие рекомендации по проведению градиентного элюирования

Глава 1.3. Принципы работы основных узлов жидкостного хроматографа

1.3.1. Насос плунжерного типа. Градиентные системы со смешением при высоком и низком давлении
1.3.2. Системы инжектирования
1.3.3. Фотометрический и флуориметрический детекторы. Поглощение УФ излучения растворителями. Другие детекторы для ВЭЖХ
1.3.4. Соединение блоков в единую хроматографическую систему

Глава 1.4. Обработка хроматографических данных. Основы качественного анализа

1.4.1. Причины шумов и дрейфа базовой линии. Отношение сигнал/шум. Предел обнаружения и предел определения
1.4.2. Разметка хроматограммы
1.5.3. Основы качественного анализа. Способы идентификации соединений. Ложноположительный и ложноотрицательный результаты идентификации

Глава 1.5. Основы количественного анализа

1.5.1. Градуировка. Методы внешнего и внутреннего стандарта
1.5.2. Измерение и его погрешность. Случайная и систематическая погрешности. Термины по ГОСТ ИСО 5725: точность (accuracy), правильность (trueness), прецизионность (precision), повторяемость (repeatability), воспроизводимость (reproducibility). Вычисление доверительного интервала. Источники погрешности. Вклад влияния шума детектора в общую погрешность измерения
1.5.3. Одноточечная градуировка
1.5.4. Многоточечная градуировка. Применение линейной и нелинейной регрессии; критерии приемлемости аппроксимации
1.5.5. Полуколичественные измерения
1.5.6. Контроль коэффициентов извлечения при помощи метода внутреннего стандарта. Применение стандартов-суррогатов (surrogate standard) и стандартов выхода (recovery standard)
1.5.7. Что такое валидация хроматографической методики

Глава 1.6. Обеспечение штатной работы ВЭЖХ

1.6.1. Рабочее место. Расположение хроматографа
1.6.2. Приготовление элюента. Заполнение насосной системы элюентом. Замена элюента
1.6.3. Фильтрация пробы. Применение ин-лайн фильтров и предколонок
1.6.4. Профилактические работы


Часть 2. ВЭЖХ для уверенных пользователей

Глава 2.1. Оптимизация хроматографического разделения

2.1.1. Теория скоростей и ее следствия. Уравнение Нокса и его упрощенные аналоги
2.1.2. Гидродинамика ЖХ колонки. Уравнение Дарси
2.1.3. Эволюция ЖХ и ЖХ колонок. Современные тренды в ВЭЖХ
2.1.4. Оптимизация разделения: общий аглоритм
2.1.5. Оптимизация разделения: принципы выбора длины колонки и размера частиц адсорбента
2.1.6. Оптимизация разделения: принципы выбора диаметра колонки
2.1.7. Регулирование основных параметров хроматографического анализа
2.1.7.1. Способы увеличения эффективности разделения
2.1.7.2. Способы сокращения времени анализа
2.1.7.3. Способы повышения чувствительности анализа (уменьшения предела определения целевых соединений)

Глава 2.2. Регулирование селективности разделения в ВЭЖХ. Неподвижные фазы для ВЭЖХ

2.2.1. Хроматографические режимы. Смешанные режимы
2.2.2. Физическая и химическая структура неподвижных фаз для ВЭЖХ
2.2.3. Обращенно-фазовая хроматография (ОФ ВЭЖХ). Неподвижные фазы для обращенно-фазовой ВЭЖХ
2.2.4. Нормально-фазовая хроматография (НФ ВЭЖХ). Гидрофильная хроматография (HILIC)
2.2.5. Ионная хроматография
2.2.6. Хроматография с переносом заряда
2.2.7. Эксклюзионная хроматография. Ионная эксклюзия


Приложение 1

П1.1. Факторы, влияющие на размывание хроматографической зоны. Выбор растворителя для приготовления пробы
П1.2. Системные пики и методы их устранения
П1.3. Применение дериватизации для повышения чувствительности и избирательности детектирования
П1.4. ВЭЖХ системы с переключением колонок. Двумерная хроматография
П1.5. Закупка хроматографа и хроматографических колонок