Нет пика АФС

[Anna13]

Всем добрый день! На работе столкнулись с такой проблемой при анализе АФС (по методике европейской фармакопеи): не выходит пик примеси + пик основного вещества выходит очень поздно (должен выходить примерно на 20 минуте, а у нас выходит на 70). Перепробовали все что можно: и систему менять, и колонки, и фазу переделывали не один раз (в том числе и соль для буфера брали другого производителя), но ничего не помогает. Но вопросов еще больше, чем ответов, т.к на другой производственной площадке все выходит как надо и никаких проблем у них нет (мы использовали ту же колонку для ВЭЖХ, что и они). У нас уже кончились идеи, что мы делаем не так.
Вот условия анализа: пф: буферный раствор рН 3.0: ACN:MeOH (6:1:3). Буферный раствор: 2,7 г/л КН2РО4 доведенный до рН 3 с помощью Н3РО4. Колонка zorbax eclipse xdb phenyl. Время хроматографирования должно быть 35 минут (согласно дмф производителя). И на раствора ППХС должно выходить 3 пика: пик примеси А, действующее вещество и пик примеси В. Само действующее вещество у нас выходит на 70 минуте, а за ним пик примеси В. Пик примеси А вообще не выходит, но когда мы заплывали ее отдельно, то время примеси А и основного пика одинаковое (нет, при приготовлении испытуемых мы ничего не перепутали). Заранее спасибо

[Иван Стыскин]

Сложно сказать что не так, надо разбираться на месте.
Приглашайте специалиста с другой производственной площадки, он внедрит методику на месте.