Янтарная кислота

[rezvan e]

Добрый день!
Никак не могу решить задачу по разделению смеси рибоксина, рибофлавина, никотинамида и янтарной кислоты.Метод ОФ ВЭЖХ, прибор Милихром А02
ПФ А: пробовал- водный раствор Na2SO4 (подкисленный серной кислотой), раствор Na2SO4 (не подкисленный), раствор перхлората лития (подкисленный и неподкисленный), раствор ортофосфорной кислоты.
ПФ Б: ацетонитрил.
Пробовал в различных режимах градиента
В одних условиях не делилась янтарная кислота и никотинамид, либо не делилась янтарная кислота и рибоксин. При использовании раствора 0,01М Na2SO4 вещества поделились, но ассиметрия больше 2х (сильно размыт задний фронт).
Подскажите как улучшить ассиметрию, либо какую-нибудь другую систему.
Заранее благодарю за любую помощь!
P.S. Пробовал ион-парную хроматографию, в качестве модификатора использовал гептилсульфонат, но результат так же не удовлитворителен.

[Константин Сычев]

Добрый день! Направление мысли в целом верное. Можно сделать от 15 до 50 мМ кислого фосфата (солью как раз можно регулировать селективность), закислив фосфоркой до рН около 2. Сразу градиент не стартовать, а с задержкой. Градиент - в основном чтобы домыть рибофлавин.
И прибор, и колонки там - уж извините - хреновые, не повезло Вам. Можно выехать только на селективности. В ион-парной эта задача не получится. Выйдет в гидрофильной, но это более высокий пилотаж.
Удачи!

[rezvan e]

Добрый день!
Смог решить проблему при помощи ион-парной хроматографии.
Элюент А гептилсульфонат натрия:фосфат калия:HAc: ТЭА
Элюент Б ацетонитрил:вода (1:1)
В градиентном режиме все прекрасно делится.

[Константин Сычев]

Ответил здесь viewtopic.php?f=19&t=310